手术室的级别分为:Ⅰ级手术室,Ⅱ级手术室,Ⅲ级手术室,Ⅳ级手术室。Ⅰ-Ⅲ级手术室有手术区和周边区之分,手术区为需要特别保护的手术台及其周围区域,余下区域均为周边区。Ⅳ级手术室不分手术区和周边区。各级手术室不同区域的空气洁净度级别不同,有5级、6级、7级、8万级及8.5级之分。
GB50333-2013中(13.3.18.4)要求采用沉降法测定沉降菌浓度时,细菌浓度测点数要和被测区域含尘浓度测点数(13.3.11-2)相同,同时应满足表13.3.18-2 规定的最少培养皿(不含对照皿)数的要求。也就是说按这两种方法中布点数多的布点。
表13.3.18-2 沉降菌最小培养皿数
被测区域洁净度级别 |
每区最小培养皿数(Φ90,以沉降30min 计) |
5级 |
13 3 |
表 13.3.11-2 测点位置表
区 域 |
最少测点数 |
手术区图示 |
Ⅰ级洁净手术室手术区和洁净辅助用房局部5 级区 Ⅰ级 周边区 |
5 点(双对角线布点)
8 点(每边内2 点) |
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Ⅱ~Ⅲ级洁净手术室手术区
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3 点(单对角线布点)
6 点(长边内2 点,短边内1点) |
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Ⅳ级洁净手术室 及分散布置送风口 的洁净室 |
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上表明确指出5级洁净度区域最少培养皿是13个;而含尘浓度的检测布点方法是(13.3.11.2)Ⅰ级手术室手术区5个,所以在测沉降菌的时候,Ⅰ级手术室手术区布点数应为13个。沉降菌最少培养皿数明确指出6级洁净度区域最少培养皿是4个;而含尘浓度的检测布点方法是Ⅰ级手术室周边区8个,所以Ⅰ级手术室周边区布点数应为8个,即Ⅰ级手术室沉降菌采样共需布21个点(不包括对照)。
沉降菌最少培养皿数指出6级洁净度区域最少培养皿是4个;而含尘浓度的检测布点方法是Ⅱ级手术室手术区3个,所以Ⅱ级手术室手术区布点数应为4个。沉降菌最少培养皿数指出7级洁净度区域最少培养皿是3个;而含尘浓度的检测布点方法是Ⅱ级手术室周边区6个,所以Ⅱ级手术室周边区布点数应为6个。即Ⅱ级手术室沉降菌采样共需布10个点(不包括对照)。
沉降菌最少培养皿数指出7级洁净度区域最少培养皿是3个;而含尘浓度的检测布点方法是Ⅲ级手术室手术区3个,所以Ⅲ级手术室手术区布点数为3个。沉降菌最少培养皿数指出8级洁净度区域最少培养皿是2个;而含尘浓度的检测布点方法是Ⅲ级手术室周边区6个,所以Ⅲ级手术室周边区布点数应为6个。即Ⅲ级手术室沉降菌采样共需布9个点(不包括对照)。
洁净手术室的等级标准(空态或静态)及沉降法测定细菌浓度布点
等级 |
手术室名称 |
沉降法细菌最大平均浓度 |
空气洁净度级别 |
布点数 | |||
手术区 |
周边区 |
手术区 |
周边区 |
手术区 |
周边区 | ||
Ⅰ |
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0.2个/30min·φ90皿 |
0.4个/30min·φ90皿 |
5级 |
6级 |
13 |
8(每边内2点) |
Ⅱ |
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0.75个/30min·φ90皿 |
1.5个/30min·φ90皿 |
6级 |
7级 |
4(四角布点) |
6(长边内2点,短边内1点) |
Ⅲ |
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2个/30min·φ90皿 |
4个/30min·φ90皿 |
7级 |
8级 |
3(单对角线布点) |
6(长边内2点,短边内1点) |
Ⅳ |
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6个/30min·φ90皿 |
8.5级 |
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注:1、采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上。(φ90,以沉降30min计)
2、检测细菌浓度,必须有2次空白对照。第1次对用于检测的培养皿做对比试验,即每次采样时留一个培养皿直接送培养并采取单盲法(即送检的人知道是对照而微生物实验室的人不知道)。第2次是在检测时,每室或每区1个对照皿,对操作过程做对照试验:模拟操作过程,但培养皿打开后即立即封盖。两次对照结果都必须为阴性。整个操作应符合无菌操作的要求。
3、 采样后的培养皿,应尽快置于37℃条件下培养24h,然后计数生长的菌落数。菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后1位。
4、当某个皿菌落数太大受到质疑时,应重测,如结果仍很大以两次均值为准;如果结果很小可再重测或分析判定。布皿和收皿的检测人员必须遵守无菌操作的要求。